Đo tế bào dòng chảy

Tài nguyên chia sẻ về phép đo lưu lượng tế bào cung cấp quyền truy cập tập trung vào các công nghệ đo tế bào tiên tiến và hỗ trợ kỹ thuật chuyên môn cho các thành viên UNMCCC, phòng thí nghiệm UNM và cộng đồng khoa học nói chung. Nguồn lực này cung cấp dịch vụ phân tích tế bào dòng chảy tiên tiến và phân loại tế bào tốc độ cao thông qua một danh mục các mô hình dịch vụ có thể mở rộng, bao gồm thu thập dữ liệu toàn diện, quy trình làm việc được hỗ trợ và sử dụng độc lập - tất cả đều được thiết kế để đáp ứng nhu cầu và trình độ chuyên môn đa dạng của người dùng.

 Các dịch vụ hỗ trợ một loạt các ứng dụng, bao gồm phân tích kiểu hình miễn dịch cổ điển, phân tích chu kỳ tế bào và apoptosis, nghiên cứu vi môi trường khối u và thâm nhiễm bạch cầu, phân loại tế bào đơn lẻ để tạo dòng đơn dòng, xây dựng thư viện CRISPR hoặc tích hợp vào quy trình phân loại để giải trình tự (ví dụ: 10x Genomics scRNA-seq). Phân loại hàng loạt cũng khả dụng cho nuôi cấy lại, cấy ghép hoặc phân tích omics hạ lưu.

Đội ngũ chuyên gia tư vấn về thiết kế bảng điều khiển, phát triển giao thức, thiết lập thiết bị và giải thích dữ liệu để đảm bảo kết quả có chất lượng cao và có thể tái tạo.

W. Curt Hines, Bằng tiến sĩ

Giám đốc khoa, Tài nguyên được chia sẻ Flow Cytometry
Phó giáo sư, Khoa Hóa sinh & Sinh học phân tử

Phòng Fitz Hall 255
Chương 915: Camino De Salud NE
Albuquerque, NM 87131
Điện thoại: 505-681-0014

Gửi email cho Tiến sĩ Hines

Josh Monts, MS

Giám đốc kỹ thuật, Tài nguyên được chia sẻ Flow Cytometry

2325 Camino de Salud, CRF 217
Trung tâm Ung thư Toàn diện UNM
Trung tâm Khoa học Y tế Đại học New Mexico
Albuquerque, NM 87131
Điện thoại: 505-925-0064

Gửi email cho Josh Monts

Thiết bị đo tế bào: Máy phân tích

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 94 / giờ

Phí không phải UNM: $ 141.94 / giờ

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 73 / giờ

Phí không phải UNM: $ 110.23 / giờ

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 113 / giờ

Phí không phải UNM: $ 170.63 / giờ

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 79 / giờ

Phí không phải UNM: $ 119.29 / giờ

Thiết bị đo tế bào: Máy phân loại tế bào

Phí hỗ trợ UNM 
Phí dụng cụ: $156/giờ + Phí kỹ thuật: $128/giờ

Phí không phải UNM
Phí dụng cụ: $235.56/giờ + Phí kỹ thuật: $181.20/giờ

 

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 73 /hr

Phí không thuộc UNM: $ 110.23 /hr

 

Ứng dụng, khả năng và sự thừa nhận

Tài nguyên được chia sẻ phép đo lưu lượng UNM
MSC 08-4640 UNM CRF 217A
Chương 915: Camino De Salud
Albuquerque, NM 87131
Điện thoại 505 925 0064

Phép đo tế bào dòng chảy có thể được sử dụng cho các ứng dụng và quy trình sau:

  • Định kiểu miễn dịch
  • Phân tích chu kỳ tế bào và bộ NST khối u
  • Thử nghiệm tăng sinh tế bào
  • Hoạt động enzym
  • Đặc điểm và định lượng cytokine
  • Đặc điểm của apoptosis và hoại tử, và khả năng sống của tế bào
  • Chuyển hóa tế bào
  • Dòng canxi nội bào
  • Phản ứng oxy hóa khử
  • Nội dung ty thể và tiềm năng màng
  • Hiệu quả chuyển gen

Giấy phép FlowJo có sẵn, vui lòng hỏi về chi phí.

Người dùng có giấy phép cổng thông tin đang hoạt động nên tham khảo điều này hướng dẫn.

Tài nguyên được chia sẻ Flow Cytometry có các khả năng sắp xếp ô sau:

  • Phân loại tế bào số lượng lớn – tối đa 4 quần thể khác nhau cùng lúc
  • Sắp xếp ô đơn trong nhiều tấm giếng
  • Yêu cầu hoạt động được hỗ trợ

Các ứng dụng phân loại bao gồm dòng tế bào đơn dòng và tạo thư viện CRISPR, bao gồm làm giàu sau chuyển gen và tinh chế mẫu không đồng nhất để nuôi cấy lại, cấy ghép hoặc giải trình tự các phân nhóm tế bào hoặc quần thể đã tinh chế.

Chính sách của Tài nguyên là tất cả người dùng mới đều phải trải qua các buổi đào tạo dành riêng cho máy. Phiên đào tạo này thường bao gồm hai phiên khác nhau với trình quản lý lõi luồng và một người dùng. Mỗi buổi nên kéo dài từ 1 đến 2 giờ.

Các buổi đào tạo là lên lịch thông qua iLabs. Đối với các câu hỏi liên quan đến iLabs hoặc thiết lập tài khoản/PR để sử dụng trong tài nguyên được chia sẻ, vui lòng email Palakshi Reddy Bandapalli hoặc gọi 505 272-4539.

Người dùng có trách nhiệm cung cấp thông tin sau cho phiên đào tạo của họ.

Các ô đã chuẩn bị @ 1x106/ml trong ống FACS/Eppendorph – Đào tạo Cytek Aurora yêu cầu ống FACS

  • Tế bào của bạn phải được lọc qua bộ lọc 50 μm trước khi chạy trên máy đo tế bào 
  • Thể tích tế bào phải nằm trong khoảng từ 500 đến 1000 μL

Các ô sau đây là bắt buộc để đào tạo

  • Kiểm soát không ổn định
  • Kiểm soát bù trừ – dưới dạng kiểm soát một màu cho mỗi chất huỳnh quang. Hạt bù trừ được ưu tiên cho các dấu hiệu mờ/hiếm. Tế bào được ưu tiên cho các dấu hiệu biểu hiện cao.
  • Mẫu nhuộm hoàn toàn

Phí đào tạo nhạc cụ:

  • Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 192 / giờ
  • Phí không phải UNM: $ 285.39 / giờ

Để xác nhận việc sử dụng tài nguyên được chia sẻ này, vui lòng đưa nội dung sau vào các ấn phẩm của bạn:

Nghiên cứu này được hỗ trợ một phần bởi Quỹ hỗ trợ Trung tâm Hỗ trợ Ung thư Toàn diện UNM NCI P30CA118100 và tài nguyên chia sẻ Flow Cytometry.

Thiết bị cốt lõi khác

  • BioTek Neo2 trong tài nguyên chia sẻ Flow CytometryTìm hiểu thêm về BioTek Neo2
  • Đầu đọc tấm đa chế độ lai
  • Bộ lọc độc lập và quang học dựa trên bộ đơn sắc
  • Phép đo độ hấp thụ, độ huỳnh quang, độ phát quang, độ phân cực huỳnh quang

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 89 / giờ

Phí không phải UNM: $ 134.39 / giờ

  • Tài nguyên được chia sẻ Magpix trong Flow CytometryTìm hiểu thêm về MAGPIX
  • Bảng điều khiển đa phân tích dựa trên hạt từ tính để định lượng dấu ấn sinh học

Phí không được hỗ trợ của UNM: $ 97 / giờ

Phí không phải UNM: $ 146.47 / giờ

Chính sách và thủ tục

Bạn có trách nhiệm đọc và hiểu thông tin này.

Tài nguyên được chia sẻ về phép đo dòng chảy của UNM cung cấp dịch vụ phân tích tế bào và phân loại tế bào nằm trong CRF 217. Để cho phép hoạt động trơn tru và quyền truy cập hợp lý vào thiết bị cho tất cả các nhà điều tra và để duy trì thiết bị theo trình tự hoạt động thích hợp, các chính sách và thủ tục hoạt động phải được tuân thủ.

Các chính sách hoạt động chính được mô tả dưới đây.

Các cuộc hẹn cho tất cả thời gian sử dụng thiết bị phải được lên lịch trong iLabs.

Cần có sự hỗ trợ của người vận hành để phân loại ô.

Các cuộc hẹn sắp xếp tế bào cần phải thông báo trước tối thiểu 24 giờ. Việc thanh toán sắp xếp ô bắt đầu khi cuộc hẹn của bạn bắt đầu; việc thanh toán kết thúc khi việc sắp xếp kết thúc. Nếu sắp xếp của bạn kết thúc sớm, bạn sẽ không bị tính phí cho thời gian đó. 

Người dùng được đào tạo, được phê duyệt có thể đặt lịch hẹn để tự hoạt động trong ngày. 

Các cuộc hẹn buổi tối và cuối tuần chỉ được phép sử dụng được đào tạo, tự vận hành.

Mặc dù việc hiệu chuẩn và các quy trình bảo trì khác là trách nhiệm của Flow Core, nhưng điều quan trọng là người dùng phải thực hiện đúng các quy trình khởi động, tắt máy và vệ sinh như được mô tả trong các buổi đào tạo.

Khử nhiễm thích hợp và làm sạch ống dẫn chất lỏng và tế bào dòng chảy phải tuân theo mỗi lần sử dụng máy đo tế bào.

Quy trình rửa và làm sạch sau mua được coi là thời gian chạy bình thường và sẽ được tính phí như một phần của tổng thời gian cuộc hẹn.

Tất cả người dùng phải được cập nhật cả khóa đào tạo về an toàn trong phòng thí nghiệm BSL1 và BSL2 (bao gồm trong Khóa đào tạo về an toàn nghiên cứu bắt buộc đối với tất cả các nhà nghiên cứu trong khuôn viên trường).

BSL3 và các mẫu phóng xạ không được phép vào cơ sở của chúng tôi trong bất kỳ trường hợp nào.

Người dùng máy đo lưu lượng tế bào mới phải được đội ngũ nhân viên cốt cán đào tạo trước khi tiếp cận thiết bị.

Người tự vận hành phải có khả năng hoạt động bình thường mà không cần sự hỗ trợ của người vận hành cơ sở, bao gồm khởi động và tắt máy, phân tích, khử trùng và bảo trì (tắc vòi phun, v.v.).

Xin lưu ý: Nếu một lượt chạy tự vận hành không cần hỗ trợ yêu cầu hơn 20 phút hỗ trợ của nhân viên, mức giá "thời gian kỹ thuật" sẽ được thêm vào để chuyển đổi đặt chỗ thành phiên hỗ trợ một phần hoặc toàn phần: thời gian sử dụng không cần hỗ trợ + thời gian kỹ thuật/giờ.

Nếu quá trình chạy của bạn diễn ra lâu hơn dự kiến ​​và sẽ vướng vào thời gian của người dùng khác, họ có quyền đụng bạn vào thời điểm bắt đầu chạy.

Người dùng cuối cùng trong ngày - Người dùng cuối cùng trong ngày có trách nhiệm tắt thiết bị phân tích. Nếu người cuối cùng trong ngày không đến được thời gian đã định thì phải báo cho người đó biết trước để tắt máy. Nếu không có người khác, người đặt cuối cùng cần đến lõi luồng và tắt máy.

Việc đặt trước có thể được thực hiện trong ngày sử dụng - và nên được thực hiện trong iLabs. Điền chính xác thời gian sử dụng vào sổ tay của từng thiết bị đảm bảo rằng các khoản phí sẽ được tính cho thời gian sử dụng của bạn trên máy

Việc đào tạo người dùng duy nhất chỉ có sẵn theo hẹn và sẽ được thực hiện bằng cách sử dụng các mẫu do điều tra viên cung cấp.

Nhân viên cốt lõi của luồng sẽ xác định thời điểm điều tra viên có thể tự vận hành.

Người sử dụng cơ sở chịu trách nhiệm về tất cả các lưu trữ dữ liệu.

Cơ sở tài nguyên được chia sẻ không có khả năng hoạt động như một kho lưu trữ dữ liệu

Người dùng phải báo cáo các sự cố tại Cơ sở ngay lập tức cho Josh Monts at jmonts@salud.unm.edu.

Chúng tôi sẽ thông báo cho người dùng khi thiết bị gặp sự cố. Nếu công cụ mà bạn đã đặt chỗ không hoạt động, chúng tôi sẽ cố gắng hết sức để hỗ trợ bạn thu thập dữ liệu của bạn trên một công cụ khác và sẽ miễn phụ phí hỗ trợ. 

Giám đốc Tiến sĩ Curt Hines là người quyết định cuối cùng về các vấn đề phát sinh tại cơ sở.